Bioactivity | BTBCT is mainly used as a label in time-resolved fluorescence immunoassays (TRFIA). The lower limit of detection for TSH TR-IFMA is 0.011 mIU/L in a 10 μl sample volume. The high fluorescence intensity and stability of BTBCT improves the sensitivity of the assay[1]. |
Invitro | 基于 BTBCT 的蛋白质标记:1:将 BTBCT 粉末以 10 mg/ml 的浓度在干燥的乙醇中溶解2:取 1 mg 的蛋白质溶解在 10 ml 的 0.1 mol/L 碳酸钠缓冲液中3:在搅拌条件下,逐渐向蛋白质溶液中滴加 150 µl 的 BTBCT 溶液。整个添加过程要缓慢进行,以避免蛋白质沉淀4:在室温下孵育混合物 2 小时5:通过 0.2 µm 的 Whatman 滤膜过滤混合物6:如果有必要,可以通过亲和层析进一步纯化标记后的蛋白质7:将纯化后的标记蛋白在含有 0.05% NaN3 的 TSA 缓冲液中透析,然后在 4 °C 下储存或根据需要冷冻保存间接血清 TSH TR-IFMA 实验步骤1:微孔板涂层:在每个微孔中加入含有 15 µg/mL 的抗 -TSH McAb-05 的涂层缓冲液 30 µL。在室温下孵育 24 小时。用洗涤缓冲液洗涤两次。2:封闭:加入封闭缓冲液 40 µL (通常含有 BSA 或其他蛋白质), 在室温下孵育 6 小时。洗涤并空气干燥。3:样本和标准品添加:向微孔中加入 10 µL 的 TSH 标准品或待测血清样本。加入 10 µL 含有生物素标记的抗 -TSH McAb-04 和 McAb-03 的混合物,浓度约为 30 ng/µL。在室温下轻轻摇动孵育 1 小时。4:洗涤:用洗涤液彻底洗涤微孔板。5:添加信号生成试剂:向每个孔中加入 20 µL 含有链霉亲和素 -BSA-BTBCT-Eu 复合物的 TSH 检测缓冲液。再次轻轻摇动孵育 20 分钟。6:最后洗涤:洗涤四次,并使用蒸馏水洗涤两次。7:荧光测定:使用时间分辨荧光仪测定每个孔的荧光强度。直接血清 T4 TRFIA 实验步骤1:微孔板准备:使用抗 -T4 抗体涂层微孔板,通常涂层浓度为 10 µg/mL。孵育涂层抗体于 4°C 过夜。2:封闭非特异性位点:使用封闭缓冲液 (通常含有 1 % BSA) 在室温下封闭微孔板 1-2 小时。3:样本和标记添加:向每个微孔中同时加入预定量的标记的 T4-BSA-BTBCT-Eu 复合物和待测血清样本或 T4 标准品。4:竞争反应:在室温下孵育板 1-2 小时。5:洗涤:使用洗涤缓冲液彻底洗涤微孔板。6:荧光测定:使用时间分辨荧光仪测定每个微孔的荧光信号。 MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only. 0 --> BTBCT 相关抗体: |
CAS | 525560-81-0 |
Formula | C26H15ClF6O6S |
Molar Mass | 604.90 |
Transport | Room temperature in continental US; may vary elsewhere. |
Storage | Please store the product under the recommended conditions in the Certificate of Analysis. |
Reference | [1]. Wu FB et al. new europium beta-diketone chelate for ultrasensitive time-resolved fluorescence immunoassays. Anal Biochem. 2002 Dec 1;311(1):57-67 |