| Description | BODIPY 493/503 (Pyrromethene 546) is a lipophilic fluorescent probe with Ex/Em of 493/503 nm. BODIPY 493/503 localizes to polar lipids and can be used to label cellular neutral lipid contents and for live and fixed cell applications. |
| In vitro | 方法：Flow cytometry 检测细胞脂滴：1、将 BODIPY 493/503 溶解为 5 mM 的 DMSO 原液，并在使用前用 PBS 以 1：2500 稀释为 2 µM 工作液。2、在与研究相关的培养条件下培养细胞，如 35 mm 孔中的 50000 个 A498 细胞。用 30 µM 油酸过夜孵育细胞可以作为中性脂质含量增加的阳性对照。3、在感兴趣的时间点，在 PBS 中制备 2 µM BODIPY 染色溶液。每个样品所需的染色溶液体积与用于培养细胞的培养基体积相对应。4、用 3 mL PBS 快速冲洗细胞以除去培养基/血清。在 37℃ 的黑暗中用 BODIPY 染色溶液培养 15 min。5、用 3 mL PBS 快速冲洗细胞以去除染色溶液。对细胞进行胰蛋白酶消化以产生单细胞悬浮液。加入 5 mL PBS 并将细胞悬浮液转移到 15 mL 锥形管中。6、离心细胞，250×g，5 min，4℃。去除上清液，用 3 mL PBS 快速冲洗细胞沉淀，再次离心，250×g，5 min，4℃。7、去除上清液，将细胞重悬于 300 µL 1×流式细胞仪缓冲液中，进行流式细胞术检测。[1]方法：Fluorescent microscopy 检测细胞脂滴：1、将 BODIPY 493/503 溶解为 1 mg/mL 的 ethanol 原液，使用前添加 10 µL 1 mg/ml BODIPY 492/503 储备溶液至 10 mL 的 150mM NaCl制备为工作液。2、染色前一天或两天，在无菌玻璃盖玻片上培养细胞。以 50%-70% 的融合度对细胞进行平板培养，使其在染色时保持半融合。3、为了增强脂滴的形成并便于检测，在固定和脂滴染色之前，用 400 µM 酸盐补充细胞生长培养基 6-24 h。4、用 2 mL PBS冲洗细胞两次。通过在室温下与 2 mL 3% (w/v) 多聚甲醛孵育 30 min 来固定细胞。5、用 2 mL PBS冲洗细胞三次。用 1 mL BODIPY 493/503 工作液覆盖细胞，并在室温下孵育 10 min，免受环境光的影响。6、用 2 mL PBS洗涤细胞三次。使用 20-40 µL 防褪色安装介质将盖玻片安装到载玻片上。7、使用荧光显微镜检测脂滴的 BODIPY 493/503 染色。[2] |
| Synonyms | BDP 493/503 lipid stain, Pyrromethene 546 |
| molecular weight | 262.11 |
| Molecular formula | C14H17BF2N2 |
| CAS | 121207-31-6 |
| Storage | keep away from direct sunlight | Powder: -20°C for 3 years | In solvent: -80°C for 1 year | Shipping with blue ice. |
| Solubility | DMF: Soluble Chloroform: Soluble Methanol: Soluble Ethanol: 0.24 mg/mL (908.38 uM) DMSO: 2 mg/mL (7.63 mM), Sonication is recommended. |
| References | 1. Qiu B, et al. BODIPY 493/503 Staining of Neutral Lipid Droplets for Microscopy and Quantification by Flow Cytometry. Bio Protoc. 2016 Sep 5;6(17):e1912. 2. Listenberger LL, et al. Fluorescent detection of lipid droplets and associated proteins. Curr Protoc Cell Biol. 2007 Jun;Chapter 24:Unit 24.2. |
| Citations | 1. Xiong Q, Sun H, Wang Y, et al.Lipid droplet accumulation in Wdr45-deficient cells caused by impairment of chaperone-mediated autophagic degradation of Fasn.Lipids in Health and Disease.2024, 23(1): 91. 2. Liszewski J, Klingelhutz A, Sander E A, et al.Development and analysis of scaffold-free adipose spheroids.Adipocyte.2024, 13(1): 2347215. |